Mga problema ng serological diagnosis ng syphilis. Interpretasyon ng mga resulta ng serological studies. Mga modernong pamamaraan sa laboratoryo at algorithm para sa pag-diagnose ng syphilis Pagkilala at pamamaraan para sa pag-diagnose ng syphilis

Ang Syphilis ay isang nakakahawang sakit na dulot ng spirochete Treponema pallidum, madaling kapitan ng progresibong talamak na kurso, na may malinaw na periodization ng mga klinikal na sintomas.

Ang pangingibabaw ng sexual transmission kaysa sa contact at transplacental ay naglalagay ng sakit na ito sa isang bilang ng mga sexually transmitted disease (STDs, STIs). Bilang karagdagan sa mga paraan ng paghahatid ng impeksyon, ang artipisyal na ruta (mula sa Latin na "artificio" - artipisyal na nilikha) ay gumaganap ng isang espesyal na papel.

Karaniwan ito para sa mga institusyong medikal, na pangunahing ipinapatupad sa isang setting ng ospital. Ang impeksyon ay nangyayari sa panahon ng pagsasalin ng dugo, iba't ibang operasyon ng kirurhiko, invasive diagnostic na pamamaraan.

Sa kabila ng quarantine ng donor blood, ang problema ng pagtuklas ng syphilis sa mga donor sa iba't ibang yugto ng sakit ay may kaugnayan pa rin.

Samakatuwid, ang mga diagnostic na hakbang para sa syphilis ay nangangailangan ng standardisasyon, ang pagpapakilala ng mga bagong sensitibo at nagbibigay-kaalaman na mga pamamaraan ng pagkakakilanlan, pati na rin ang pagliit ng mga pagkakamali at maling interpretasyon ng mga resulta ng pagsubok.

Ipakita lahat

1. Pag-uuri ng mga pamamaraan ng diagnostic sa laboratoryo

Ang diagnosis ng syphilis ay may ilang mga tampok at naiiba sa diagnosis ng iba pang bacterial infection. Ang kumplikadong istraktura at mga antigenic na katangian ng maputlang treponema ay nagdudulot ng mga pagkakamali sa interpretasyon ng mga resulta ng mga pagsusuri sa serological.

Ang pagsusuri ng dugo para sa syphilis ay inaalok sa 3 pangunahing grupo ng mga pasyente:

1. 1 Screening at prophylactic na medikal na pagsusuri ng mga pangkat ng populasyon (kabilang ang pagbubuntis, pagpaparehistro sa antenatal clinic, pagpasok sa trabaho at pagpaparehistro ng isang medikal na libro, at iba pa).
2. 2 Pagsusuri sa mga pangkat na may panganib (hindi protektadong pakikipagtalik sa isang taong nahawaan ng syphilis, mga taong pagkatapos ng sapilitang pakikipagtalik, nahawaan ng HIV, at iba pa).
3. 3 Mga taong may sintomas o pinaghihinalaang may impeksyon sa syphilitic.

Ang lahat ng mga pamamaraan sa laboratoryo ay may kondisyon na nahahati sa direkta at hindi direkta.

1.1. Direktang Pamamaraan

1. 1 Pagkilala sa Treponema pallidum sa madilim na larangan (dark field microscopy).
2. 2 Impeksyon ng mga pang-eksperimentong hayop (pag-kultura sa mga hayop sa laboratoryo).
3. 3 PCR (polymerase chain reaction).
4. 4 DNA probe o hybridization mga nucleic acid.

1.2. Mga Di-tuwirang Pamamaraan

Ang mga reaksyon ng serological ay mga pamamaraan ng diagnostic sa laboratoryo batay sa pagtuklas ng mga antibodies (dinaglat bilang AT) sa mga antigen ng maputlang treponema (dinaglat bilang AG). Mahalaga ang mga ito para kumpirmahin ang diagnosis.

1. 1 Mga pagsubok na hindi treponemal:
   • Reaksyon ng Wasserman (RSK);
   • Ang reaksyon ng microprecipitation (MR, RMP) at ang mga analogue nito, na ibinigay sa ibaba;
   • Rapid plasma reagin test (RPR, RPR);
   • Subukan na may pulang toluidine at suwero (TRUST);
   • Non-treponemal test ng Laboratory for the Study of Sexually Transmitted Diseases - VDRL.
2. 2 Mga pagsubok sa Treponemal:
   • R-tion ng immobilization ng Treponema pallidum - RIBT / RIT;
   • R-tion ng immunofluorescence - RIF, FTA (pagbabanto ng sera RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
   • R-tion ng passive hemagglutination (RPHA, TRPGA, TPHA);
   • ELISA (ELISA, EIA);
   • Immunoblotting.



Figure 1 - Syphilis serodiagnosis algorithm

1.3. Histomorphological na pamamaraan

Ang mga pamamaraan na ito ay nabawasan sa pagtukoy ng mga tampok ng histomorphology ng syphilitic manifestations. Ang pansin ay binabayaran sa mga subtleties ng istraktura ng hard chancre. Gayunpaman, ang differential diagnosis ng impeksyon gamit ang histology ay napakahirap. Ginagamit ang histomorphology kasama ng iba pang mga laboratoryo at klinikal na pagsubok.

2. Dark field microscopy ng Treponema pallidum

Ang pamamaraang ito ay batay sa direktang pagtuklas ng maputlang treponema sa materyal na pinag-aaralan gamit ang isang mikroskopyo at mga espesyal na aparato (madalas na naglalabas ng mga erosions at ulcers, mas madalas na cerebrospinal fluid at iba pang mga substrate).

Sa tulong ng scarification, pag-scrape, pagpiga mula sa mga erosions at ulcerative defects, ang exudate ay nakuha, pagkatapos ay ang handa na paghahanda ay sinusuri sa ilalim ng isang mikroskopyo.

Karaniwan, ang mga maputlang treponema ay napansin sa paghahanda na nakuha mula sa chancre, mula sa foci ng pangalawang sariwa, pangalawang paulit-ulit na syphilis, pati na rin ang punctate ng mga lymph node, inunan.

Batay sa kababalaghan ng glow ng maliliit na particle sa isang madilim na field kapag tinamaan ng sinag ng liwanag (Tyndall phenomenon), ang pamamaraan ay perpektong nagbibigay-daan sa iyo upang iibahin ang causative agent ng syphilis mula sa iba pang treponemas batay sa mga pagkakaiba sa morphological at mga pagkakaiba sa mga paraan. gumagalaw ang bacterium.

Para sa mikroskopya, ginagamit ang isang espesyal na dark-field condenser ng naaangkop na optical resolution. Ang gamot ay nakuha sa pamamagitan ng durog na paraan ng drop (isang patak ng materyal ay inilapat sa isang malinis, walang taba na salamin na slide at tinatakpan ng isang napakanipis na coverslip).

Ang immersion oil ay ibinabagsak sa coverslip. Sa pamamagitan ng pag-ikot ng tubo at pag-ikot ng magnifying lens, ang nais na pag-iilaw ay nababagay.

Sa madilim na larangan ng mikroskopyo, ang mga selula ng dugo, mga epithelial cell at ang causative agent ng syphilis ay nakita. Ang maputlang treponema ay mukhang isang spiral, napaka manipis, nagniningning ng isang kulay-pilak na kulay, na may makinis na paggalaw.



Figure 2 - Dark field microscopy bilang isang paraan upang mailarawan ang maputlang treponema sa materyal na pinag-aaralan. Pinagmulan ng larawan - CDC

Ang Treponema pallidum ay dapat na nakikilala mula sa iba pang mga treponema, kabilang ang Tr. refringens, na matatagpuan sa oropharynx at genital mucosa. Ang bacterium na ito ay gumagawa ng magulong paggalaw, may malawak at walang simetriko, sa halip magaspang na mga kulot. Bilang karagdagan, ang Treponema pallidum ay nakikilala mula sa Tr. Microdentium, Tr. Buccalis at Tr. vincenti.

Ang visualization ng bacteria sa isang madilim na field ay minsan ay dinadagdagan ng fluorescence reaction. Para dito, ang mga antitreponemal antibodies na may label na fluorescent dye ay idinagdag sa katutubong materyal. Sa kasong ito, nabuo ang isang complex, na tinatawag na antigen-antibody (dinaglat bilang AG-AT), na siyang bagay para sa pagsusuri gamit ang isang luminescent microscope.

3. Paraan ng polymerase chain reaction (PCR)

Ang PCR, na binuo noong 1991 upang makita ang molekula ng deoxyribonucleic acid (DNA) ng treponema pallidum, ay lubhang sensitibo at tiyak, na nagpapahintulot sa pagtuklas ng mga fragment ng DNA ng pathogen.

Ang pagsusuri na ito ay batay sa pagkopya ng mga maikling seksyon ng spirochete pallidum DNA, na nakakatugon sa mga tinukoy na parameter at naroroon sa sample. Ang lahat ng ito ay ginagawa sa ilalim ng mga artipisyal na kondisyon (in vitro). Ang reaksyon ay isinasagawa sa isang aparato - isang amplifier, na nagbibigay ng periodization ng mga cycle ng temperatura. Nangyayari ang paglamig, na sinusundan ng pag-init ng mga test tube na may error na 0.1˚С.

Ang template ng DNA ay pinainit ng 2 minuto sa temperatura na 92-98°C (ang pinakamataas na temperatura ay ginagamit kung ang polymerase ay thermostable). Kapag pinainit, ang mga hibla ng DNA ay nag-iiba dahil sa pagkasira ng mga bono ng hydrogen sa pagitan nila. Sa hakbang ng pagsusubo, ang temperatura ng reaksyon ay binabaan upang itali ang primer sa nag-iisang stranded na template.

Ang pagsusubo ay tumatagal ng humigit-kumulang 30 segundo, kung saan daan-daang mga nucleotide ang na-synthesize. Ang mga bagong synthesize na molekula ay kinopya ng polymerase, bilang isang resulta, ang mga tiyak na fragment ng deoxyribonucleic acid ay tumataas nang maraming beses. Ang kasunod na pagtuklas ng mga fragment ay isinasagawa gamit ang agar gel electrophoresis.

Ang mga diagnostic ng PCR ng syphilis ay likas na pang-eksperimento, ngunit ito ay makatwiran kapag ang isang congenital infection ay nakita, sa mahirap na diagnostic na mga kaso, o may kaunting nilalaman ng maputlang treponema sa materyal na pagsubok.

4. DNA hybridization

Ginagawa ang hybridization ng DNA sa vitro at batay sa kumpleto o bahagyang koneksyon ng dalawang single-stranded na molekula ng DNA sa isang molekula. Sa kaso ng isang kumpletong tugma ng mga pantulong na fragment, ang unyon ay madali. Kung ang komplementaryong tugma ay bahagyang, kung gayon ang pagkakaugnay ng mga chain ng DNA ay nangyayari nang dahan-dahan. Batay sa oras ng chain fusion, ang antas ng complementarity ay maaaring matantya.

Kapag ang DNA ay pinainit sa isang buffer solution, ang mga hydrogen bond ay nasisira ng mga nitrogenous na base na komplementaryo, bilang resulta, ang mga chain ng DNA ay naghihiwalay. Susunod, ang isang paghahanda ay nakuha mula sa dalawang denatured deoxyribonucleic acids. Sa paglamig, muling nabubuo ang mga single-stranded na rehiyon. Ang tinatawag na DNA hybrid ay nabuo.

Ginagawang posible ng pamamaraan na matantya at suriin ang rate ng pagsusubo, na isinasaalang-alang ang mga tampok (pagkakatulad at pagkakaiba) ng DNA sa pagitan ng mga species o sa loob ng isang species.

Ang paggamit ng DNA probe ay binubuo sa pag-hybrid ng isang may label na DNA fragment na may partikular na rehiyon ng DNA upang matukoy ang mga pantulong na nucleotide sequence. Ang isang pangkat ng mga unsaturated atoms (chromophores) o radioactive isotopes ay ginagamit upang lagyan ng label ang probe.

Ang DNA probe ay ginagamit para sa heterogenous at homogenous na pagtuklas ng mga nucleic acid. Ang papel ng probe ay upang matukoy ang mga lugar kung saan naganap ang target-probe fusion. Ang pagtuklas sa isang homogenous na sistema ay may kalamangan na masubaybayan ang hybridization ng mga molekula ng DNA sa real time.

Ang kakanyahan ng pamamaraan ay nabawasan sa DNA denaturation at renaturation (reunification ng DNA chain). Ang proseso ng renaturation ng nucleic acid at DNA probe ay nagtatapos sa pagbuo ng isang "hybrid".

Ang mga partikular na sequence ng nucleic acid ay nagha-hybrid sa isang DNA probe at sa gayon ay nakita at pinapayagan ang dami ng DNA sa materyal na pansubok na matantya.

5. Impeksyon ng mga hayop sa laboratoryo

Ang mataas na sensitivity ng mga kuneho sa Treponema pallidum (mga 99.9%) ay nagpapahintulot sa kanila na magamit sa pagsusuri ng impeksyon sa syphilitic.

Ang impeksyon ng mga kuneho ay isinasagawa sa mga sentro ng pananaliksik at ito ang "pamantayan ng ginto" para sa pagtatasa ng sensitivity ng iba pang mga pamamaraan.

Bumalik tayo sa mga pagsusulit na treponemal at hindi treponemal, dahil kadalasang ginagamit ang mga ito. Isaalang-alang ang kanilang mga pakinabang at disadvantages, pati na rin ang mga pagkakamali sa interpretasyon ng mga resulta.

6. Mga pagsubok na hindi treponemal

Ito ay mga pagsubok upang matukoy IgG antibodies at IgM sa standardized cardiolipin antigen. Ang kanilang makabuluhang disbentaha ay ang kanilang medyo mababang pagtitiyak.

Ang mababang gastos at kadalian ng pagpapatupad ay nagbibigay-daan sa mga pagsusulit na ito na mauuri bilang mga pagsusuri sa diagnostic na pagsusuri na kinakailangan para sa pagtatatag ng isang paunang pagsusuri at pagsusuri sa populasyon.

Ito ay mga non-treponemal na pagsusuri na ibinibigay kapag nagrerehistro ng isang medikal na libro, nag-aaplay para sa isang trabaho, nagrerehistro sa isang antenatal clinic.

Mga disadvantages:

1. 1 Pinakamababang sensitivity sa yugto ng pangunahing syphilis - 70%;
2. 2 Pinakamababang sensitivity sa yugto ng late syphilis - 30%;
3. 3 Posibilidad ng false-negative at false-positive na resulta;
4. 4 Ang pagiging kumplikado ng pagpapatupad ng RSC.

Mga kalamangan:

1. 1 Medyo mababa ang gastos ng paggawa ng pagsubok;
2. 2 Kumuha ng mabilis na tugon;
3. 3 Posibilidad ng kanilang aplikasyon para sa screening.

Ang pagkuha ng false-positive o mahinang positibong sample ay posible sa mga sumusunod na kaso:

1. 1 Paglabag sa teknolohiya ng pagpapatupad, kapag hinaharangan ang AG-AT complex.
2. 2 Ang pasyente ay may mga sakit na autoimmune (rheumatoid arthritis, rayuma, scleroderma, systemic lupus erythematosus, sarcoidosis, atbp.).
3. 3 Malignant neoplasms.
4. 4 Mga impeksyon sa viral at bacterial.
5. 5 Endocrine disease (autoimmune thyroiditis, diabetes mellitus).
6. 6 Pagbubuntis.
7. 7 Pag-inom ng alak.
8. 8 Pagkain ng matatabang pagkain.
9. 9 katandaan.

Tulad ng nakikita mo mula sa listahan, may sapat na mga dahilan para sa isang hindi tamang resulta. Samakatuwid, dapat itong tratuhin nang may malaking pag-iingat. Isaalang-alang natin ang dalawa pang sample kasama ng RSC. Ito ay isang reaksyon ng microprecipitation at VDLR (pagbabago nito).

7. Complement fixation reaction (RSK, Wasserman, RW)

Ito ay isang pagsubok batay sa kakayahan ng pandagdag na magbigkis sa mga AG-AT complex. Ang nagresultang kumplikado ay kinilala gamit ang isang hemolytic system. Ang cardiolipin antigen ay makabuluhang nagpapataas ng sensitivity ng sample.

Ang sensitibo ay ang reaksyon ng Colmer, na binubuo sa pagganap sa iba't ibang mga kondisyon ng temperatura. Kaya, ang unang yugto ng reaksyon ng Colmer ay nagpapatuloy sa temperatura na 20˚С sa loob ng kalahating oras, ang pangalawang yugto sa temperatura na 4-8˚С sa loob ng 20 oras. Sa panahong ito, nangyayari ang complement binding.

Kapag nagsasagawa ng RSK, posibleng makakuha ng mga positibong resulta. Ang dahilan ay marahil ay isang malaking titer ng antibody sa undiluted serum. Sa kasong ito, ang mga sample ay inilalagay na may pagbaba ng dosis.

Upang pag-iba-iba ang mga yugto ng syphilis at suriin ang pagiging epektibo ng antisyphilitic na paggamot, ang dami ng antibodies sa suwero ay tinutukoy.

Ang positivity ng sample ay tinasa gamit ang mga krus; gayundin, sa mga reaksyon ng Wasserman, Colmer at Cann, ang serum dilution ay ipinahiwatig.

8. Reaksyon ng microprecipitation

Dahil ang pagiging kumplikado ng pagsasagawa ng mga pagsusuri sa itaas ay mataas, ang isang pinabilis na pamamaraan para sa syphilis serodiagnosis, ang tinatawag na express method, ang reaksyon ng microprecipitation (dinaglat na MR, RMP), ay binuo para sa lawak ng saklaw ng mga medikal na pagsusuri ng iba't ibang grupo ng populasyon .

Ginagawa ito kasama ng cardiolipin antigen at mga excipients. Ang bentahe nito ay ang koleksyon ng peripheral blood para sa pananaliksik. Ito ay makabuluhang nagpapabilis sa parehong pamamaraan mismo at ang gawain ng mga katulong sa laboratoryo.



Figure 2 - Reaksyon ng microprecipitation (scheme)

Ang MR ay nangangailangan ng plasma o hindi aktibo na serum ng pasyente (naglalaman sila ng mga antibodies). Susunod, ang plasma ay inilalagay sa minarkahang mga balon. Pagkatapos, ang isang patak ng cardiolipin antigen ay idinagdag sa materyal ng pagsubok, halo-halong at inalog. Bilang isang resulta, ang mga katangian ng mga natuklap ay lumilitaw sa suwero ng taong nahawahan, na nag-iiba sa intensity.

Isa itong pagsubok sa kalidad. Gumagamit ang quantification ng 10 dilution ng serum na inilagay sa 10 na angkop na may label na mga balon. Sa qualitative MR, ang tugon ay ipinahiwatig sa anyo ng mga krus (plus) o minus, na may quantitative MR, ang antibody titer ay ipinahiwatig (1:2, 1:4, at iba pa).

Ang pagkakaroon ng mga natuklap ay itinuturing na positibo o mahinang positibong tugon. Ang hitsura ng isang flocculate ay posible rin sa kawalan ng isang sakit, samakatuwid, ang pangwakas na pagtatasa ng resulta na nakuha ay isinasagawa pagkatapos ng isang control study o iba pang mga reaksyon (RIBT, RIF, ELISA, RPHA).

9. VDR

Ang paraan na inirerekomenda ng World Health Organization para sa pag-set up ng isang reaksyon na may isang antigen na may likas na lipoid (AH) ay nararapat na ituring na pinakamahusay sa iba pang karaniwang mga pagsubok na hindi treponemal. Binuo sa USA, Georgia sa laboratoryo ng mga venereal na sakit (Veneral Diseases Research Laboratories).

Ang pagdadaglat ng institusyon ay nagsilbing pangalan para sa sample - VDRL. Ang VDRL ay isang pagbabago ng MP. Ang serum mula sa isang pasyente na may syphilis ay hindi aktibo at inilagay sa isang glass slide. Ang antigen na ginamit ay binubuo ng cardiolipin, cholesterol at lecithin sa iba't ibang porsyento. Ang sagot ay nakarehistro kaagad.

Ang kakaibang flocculation ay nangyayari sa pagkakaroon ng mga antibodies sa suwero. Ang serum ay nagiging reaktibo 4 na linggo pagkatapos ng impeksyon. Upang masuri ang dami ng mga antibodies, ang serum ay pre-diluted exponentially.

Mga Bentahe ng VDR:

1. 1 medyo mataas ang sensitivity;
2. 2 medyo mataas na pagtitiyak;
3. 3 kadalian ng pagpapatupad;
4. 4 mababang halaga ng mga reagents;
5. 5 makakuha ng mabilis na tugon.

Ang kawalan ng VDRL ay ang medyo mataas na false positive rate.

Ang kanilang mga sanhi ay ang lahat ng parehong sakit na nakalista sa itaas.

Ang mga pagsusuri sa Treponemal ay isinasagawa gamit ang mga tiyak na Treponema pallidum antigens. Ang mga ito ay kinakailangan at sapilitan para sa pagtatatag ng panghuling pagsusuri. Ito ay isang immunofluorescence reaction (RIF), indirect hemagglutination reaction (IPHA), enzyme immunoassay (ELISA), atbp.

Pagkatapos ng isang positibong resulta ng isang hindi-treponemal na pagsubok (RPR, MP, VDRL), ang mga pagsusuri sa treponemal ay dapat palaging isagawa (mas madalas isang kumbinasyon - RPHA, ELISA, RIF).

Ang mga pagsusuri sa treponemal ay mas mahirap gawin kaysa sa mga mabilis na pagsusuri at nagkakahalaga ng mas maraming pera.

10. RIF

Ang reaksyong ito (pinaikling RIF) ay ginagamit upang masuri ang syphilis, kabilang ang mga nakatagong anyo, at muling suriin ang mga positibo at maling positibong sample.

Ang RIF ay batay sa ningning ng mga may label na antibodies kapag pinagsama sa isang antigen-antibody complex sa ilalim ng isang quartz lamp. Ang pamamaraan ay nagsimulang gamitin noong 60s at nakikilala sa pamamagitan ng kadalian ng pagpapatupad at mataas na pagtitiyak (na bahagyang mas mababa sa RIBT).

Mayroon itong ilang mga pagbabago: RIF-10, RIF-200 at RIF-abs.

Ang pinakasensitibong RIF sa dilution ay 10 beses, at ang iba ay mas tiyak. Ang RIF ay isinasagawa sa dalawang yugto. Ang serum ng dugo ng pasyente ay idinagdag sa AG. Ang isang AG-AT complex ay nabuo, na sinisiyasat sa susunod na yugto. Ang fluorochrome-labeled complex ay makikilala sa pamamagitan ng microscopy. Kung walang glow na sinusunod, ito ay nagpapahiwatig ng kawalan ng mga tiyak na antibodies sa serum ng dugo.

Ang RIF-200 ang pinakamahalaga sa lahat ng dilution. Ang pamamaraan ay idinisenyo upang masuri ang iba't ibang anyo ng syphilis, lalo na ang latent syphilis, at muling suriin ang mga positibong sample.

11. RIBT

Ang reaksyon ng immobilization ng Treponema pallidum (pinaikling RIBT, RIT) ay isa sa mga kumplikadong serological na pagsusuri na nangangailangan ng malaking pagsisikap at gastos sa pananalapi. Ang RIBT ay ginagamit nang mas kaunti, ngunit ang kaugnayan nito ay nananatili sa diagnosis ng latent syphilis.

Ito ay may malaking kahalagahan sa pagkilala sa mga maling positibong resulta sa mga buntis na kababaihan at batay sa immobilization ng bakterya sa pagkakaroon ng mga immobilisin - late antibodies.

Ang resulta ay sinusuri sa porsyento (%) ng immobilized treponema gamit ang isang espesyal na talahanayan:

1. 1 Mula 0 hanggang 20 - negatibong pagsubok.
2. 2 Mula 21 hanggang 50 - mahinang positibong pagsubok.
3. 3 Mula 50 hanggang 100 - positibong reaksyon.

Posible rin ang mga maling positibong resulta sa RIBT. Kaya, ang isang maling sagot ay posible sa impeksyon sa tropikal na trepanema, pati na rin sa tuberculosis, cirrhosis ng atay, sarcoidosis at mga pasyente ng senile.

12. RPGA

Ang pagsusuri sa dugo na ito para sa syphilis ay tinatawag na passive hemagglutination test (pinaikling dugo para sa TPHA, TPHA).

Ang antigen para sa TPHA ay inihanda mula sa ram erythrocytes na pinahiran ng mga fragment ng maputlang treponema (nakuha mula sa mga nahawaang kuneho (tingnan ang Larawan 4)). Para sa pagsusuri, ginagamit ang venous blood (plasma o inactivated serum) ng pasyente.

Kapag ang isang antigen ay idinagdag sa serum ng isang pasyente na may syphilis, isang AG-AT complex ay nabuo, na humahantong sa agglutination ng mga pulang selula ng dugo. agglutination ay tinutukoy subjectively sa pamamagitan ng isang laboratory assistant.



Figure 3 - Scheme ng RPHA (passive hemagglutination reaction)

Ang sample ay sinusuri bilang positibo kapag ang mga agglutinate ng isang pare-parehong kulay rosas ay lumitaw. Ang kulay ng precipitate sa pula ay nagpapahiwatig ng pagtitiwalag ng mga erythrocytes. Ang RPHA ay lubos na sensitibo at lubos na tiyak.

12.1. Reaksyon ng microhemagglutination

Ito ay isang pinasimpleng bersyon ng RPGA. Naiiba sa sample na inilarawan sa itaas sa pagkakaroon ng mas kaunting antigen, diluent, at serum ng dugo upang maisagawa ang reaksyon. Maaaring masuri ang sample 4 na oras pagkatapos ng serum incubation. Ginagamit ito sa screening at mass examinations para sa syphilis.

13. Enzyme immunoassay

Ang enzyme-linked immunosorbent assay (dinaglat bilang ELISA) ay batay sa isang partikular na reaksyon ng antigen-antibody. Ang biological na materyal (serum ng dugo ng pasyente, cerebrospinal fluid) ay ipinakilala sa mga balon, sa solidong ibabaw kung saan ang mga antigen ng maputlang treponema ay naayos. Ang materyal na pagsubok ay incubated, pagkatapos ay ang mga antibodies na hindi nakagapos sa mga antigens ay hugasan (tingnan ang Larawan 5).

Ang pagkilala sa nagresultang kumplikado ay isinasagawa sa yugto ng pagbuburo gamit ang immune serum na may label na enzyme. Sa panahon ng isang kemikal na reaksyon, kinukulayan ng enzyme ang mga resultang complex. Ang intensity ng paglamlam ay depende sa dami ng mga tiyak na antibodies sa dugo ng pasyente at naitala ng isang spectrophotometer.



Figure 4 - Scheme ng ELISA (enzymatic immunoassay)

Ang pagiging sensitibo ng ELISA ay higit sa 95%. Ang pamamaraan ay ginagamit sa isang automated na mode upang pag-aralan ang mga itinalagang pangkat ng populasyon: mga donor, mga buntis na kababaihan at iba pa, upang linawin ang diagnosis sa kaso ng positibo at maling positibong hindi treponemal na pagsusuri.

14. Immunoblotting

Ang immunoblotting ay isang napakasensitibong pamamaraan, isang pagbabago ng isang simpleng ELISA. Ang reaksyon ay batay sa electrophoresis na may paghihiwalay ng maputlang treponema antigens.

Ang mga hiwalay na immunodeterminants ay inililipat sa nitrocellulose na papel at ipinapakita sa ELISA. Ang serum ay pagkatapos ay incubated at unbound antibodies ay hugasan off. Ang resultang materyal ay ginagamot ng mga immunoglobulin na may label na enzyme (IgM o IgG).

15. Klinikal na pagsusuri ng mga resulta ng pagsusuri sa laboratoryo ng syphilis

Sa talahanayan 1 sa ibaba, ibinigay namin ang mga posibleng resulta ng mga pagsusuri at ang kanilang interpretasyon. Tulad ng makikita mo sa talahanayan, ang pangunahing halaga sa pag-decipher ay ang komprehensibong pagtatasa ng mga pagsubok.



Talahanayan 1 - Pag-decipher sa mga resulta ng mga serological na reaksyon (mga pagsusuri sa dugo para sa syphilis). Mag-click sa talahanayan upang tingnan

Ang reaktibiti ng mga pagsubok ay sinusuri din ng "mga krus":

1. 1 Ang pinakamataas na tugon (malakas na positibong pagsubok) ay ipinahiwatig ng 4 na mga krus.
2. 2 Ang isang positibong sample ay ipinahiwatig ng 3 mga krus.
3. 3 Ang mahinang positibong reaksyon ay ipinahihiwatig ng dalawang krus.
4. 4 Ang isang krus ay nagpapahiwatig ng kahina-hinala at negatibong resulta.
5. 5 Ang negatibong sagot ay minarkahan ng minus sign.

Ang problema ng pag-optimize ng pagsusuri sa laboratoryo ng syphilis ay hindi nawala ang kaugnayan nito hanggang sa kasalukuyan. Ang mga modernong pamamaraan ng diagnostic, sa kabila ng pagnanais ng mga siyentipiko na dalhin ang mga diagnostic sa pinakamataas na posibleng sensitivity at specificity, ay nangangailangan ng isang control check at isang indibidwal na diskarte.

Ang isang tampok ng impeksyon sa syphilitic ay ang kababalaghan ng seroresistance, na hindi nakatanggap ng isang pang-agham na paliwanag. Ang diagnosis ay ginawa pagkatapos ng isang buong pagsusuri ng pasyente sa pamamagitan ng epidemiological, klinikal, mga pamamaraan sa laboratoryo.

Laban sa background ng pang-ekonomiya at teknikal na pag-unlad ng gamot, mayroon ding pag-unlad sa pagbuo ng mga bagong pamantayan para sa pag-diagnose ng syphilis. Ang lahat ng ito ay magpapahintulot sa iyo na mabilis, matagumpay at tumpak na gamutin ang mga pasyente.

Mga hindi direktang pamamaraan para sa pag-diagnose ng syphilis.

Para sa diagnosis ng syphilis, maraming mga pamamaraan ng pananaliksik ang ginagamit, naiiba sa pamamaraan at layunin. Ang mga direktang pamamaraan ay naglalayong tuklasin ang pathogen sa materyal ng pagsubok gamit ang microscopy (dark field microscopy, atbp.) o PCR.

Bilang karagdagan sa mga pamamaraan ng direktang pagtuklas ng maputlang treponema (T. pallidum), kapag sinusuri ang syphilis, hindi direkta ( serological) mga pamamaraan ng pananaliksik na nakakakita ng mga antibodies sa causative agent ng syphilis sa serum ng dugo at cerebrospinal fluid. Ang mga hindi direktang pamamaraan para sa pag-diagnose ng syphilis ay kinabibilangan ng mga serological na pagsusuri ng ELISA, RPHA, CSR, RIF at RIF-abs, RIBT, PCR, express method, immunoblot, at iba pa.

Mga pamamaraan ng serological para sa pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit.

Pamantayan ng serological diagnostic batay sa mga tiyak na reaksyon ng antigen-antibody. Ang mga antigens (mga bahagi ng mga pader ng cell, flagella, mga kapsula, DNA at mga lason) ng mga mikroorganismo na kailangang matukoy ay tumutugon sa mga antibodies na nasa sera. Ang pagbubuklod ay nangyayari sa pagitan ng mga antigen at kanilang kaukulang antibodies, na siyang batayan ng mga pamamaraan ng serological diagnostic. Ang mga serological test ay ginagamit upang tuklasin ang isang hindi kilalang antigen (pinagmulan kung saan ay isang bacterium, virus, lason, atbp.) gamit ang isang kilalang antibody o upang tuklasin ang isang antibody sa serum gamit ang isang kilalang antigen.

Ang mga reaksyon ng serological ay inuri depende sa estado ng antigen at sa mga katangian ng kapaligiran kung saan nakikipag-ugnayan ang antigen at antibody, pati na rin ang paraan ng pagsasagawa.

Upang magsagawa ng serological reaksyon, maraming mga pamamaraan sa laboratoryo ang ginagamit, tulad ng agglutination, precipitation, complement fixation, immunofluorescence, enzyme immunoassay at radioimmunoassay, at iba pa. Ang mga reaksyong ito ay nagbibigay-daan sa mahusay na paunang pagkakakilanlan ng mga microorganism.

Ang sera na kinakailangan para sa pag-set up ng mga serological na reaksyon ay nakukuha sa eksperimento, lalo na, ang mga ito ay ginawa ng mga institusyon ng mga bakuna at sera, at inaalok bilang bahagi ng mga komersyal na diagnostic kit.

Ang mga serological na pamamaraan ay isang mahalagang kasangkapan sa pagsusuri at paggamot Nakakahawang sakit mga tao at hayop, dahil sa kanilang tulong posible hindi lamang upang matukoy ang sanhi ng ahente ng sakit, kundi pati na rin upang makita ang mga tiyak na antibodies sa kaukulang mga pathogen sa dugo ng mga pasyente at mga nakuhang pasyente. Serological na pamamaraan sa ngayon ay ang pinaka-epektibong pamamaraan ng diagnostic kapag imposible o mahirap na ihiwalay ang pathogen, at medyo bihirang magbigay ng maling positibo at maling negatibong resulta.

Paggamit ng mga serological na pamamaraan upang masuri ang syphilis

Ang batayan ng mga pamamaraan ng serological laboratoryo para sa pag-diagnose ng syphilis ay ang kakayahan ng katawan na magbigay ng immune response sa hitsura ng pathogen. Sa tulong ng mga serological na reaksyon sa serum (plasma) ng dugo (o cerebrospinal fluid), ang mga bakas ng immune response sa impeksyon ay napansin, lalo na ang mga antibodies sa maputlang treponema antigens, o ang mga antigen mismo.

Upang maitatag ang tiyak na katangian ng umiiral mga klinikal na pagpapakita(ibig sabihin, ang mga ito ay bunga ng syphilis) at, sa hinaharap, upang makontrol ang dynamics ng proseso ng pathological, iminungkahi malaking bilang ng mga pamamaraan ng serological na pananaliksik. Ang parehong mga pamamaraan na ito ay malawakang ginagamit para sa pagsusuri ng populasyon.

Alinsunod sa kasalukuyang pambansang mga alituntunin at mga klinikal na alituntunin, sa maraming bansa sa buong mundo, ang mga advanced na serological na pamamaraan ay ginagamit sa mga survey ng populasyon upang makilala ang mga pasyenteng may syphilis at sa pagtatatag ng klinikal na diagnosis. Ginagamit ang mga ito na parang mga klinikal na palatandaan sakit sa mga pasyente, at sa mga nakatagong panahon.

Ang pagtatakda ng mga reaksyon ng serological ay isa sa mga pinaka-maaasahang pamamaraan para sa pag-diagnose ng syphilis. Ang mga standardized serological test na may regulated method of setting ay tinatawag na serological tests para sa syphilis. Isinasaalang-alang na halos lahat ng mga serological na reaksyon sa syphilis sa ilalim ng ilang mga kundisyon ay maaaring maling positibo o maling negatibo, dapat silang ilagay sa isang kumplikado at, kung kinakailangan, sa dinamika.

Ang mga serological na pagsusuri, na ginagamit upang matukoy ang mga antibodies sa serum ng dugo ng pasyente, ay naiiba sa bawat isa sa pagiging sensitibo, pagtitiyak, pagiging kumplikado ng setting at gastos. Bilang karagdagan sa mga klasikal na pamamaraan, ang mga immunological na pagsusuri at teknolohiya ay ginagamit para sa epektibong syphilis serodiagnosis, na nakatanggap ng bagong impetus sa pag-unlad sa ika-21 siglo.

Natutukoy ang mga antibodies sa pamamagitan ng iba't ibang paraan ng immunochemical (serological), kabilang ang mga sedimentary reactions, enzyme immunoassay, immunochemiluminescence, immunochromatographic assays, linear immunoblotting, flow fluorometry, immunochip technology, at iba pa.

Ang Serodiagnosis (isang pag-aaral gamit ang mga serological na pamamaraan) ay ginagamit para sa:

• kumpirmasyon ng klinikal na diagnosis ng syphilis,
• diagnosis ng latent syphilis,
• pagsubaybay sa pagiging epektibo ng paggamot, bilang isa sa mga pamantayan para sa pagpapagaling ng mga pasyente na may syphilis,
• pag-iwas sa syphilis (pagsusuri sa pagsusuri ng ilang mga grupo ng populasyon upang makilala ang patolohiya).

Ang pinakamahalagang katangian na kinakailangan ng mga serological na pagsusuri - sensitivity, specificity, reproducibility

Ang mapagpasyang pamantayan para sa pagpili ng isang pamamaraan ng diagnostic sa laboratoryo ay ang pagiging epektibo nito - pagiging sensitibo, pagtitiyak at muling paggawa.

Pagkamapagdamdam ay ang proporsyon ng mga positibong resulta sa mga pasyente. Ang sensitivity ng pamamaraan ay tinutukoy ng porsyento ng mga positibong resulta ng pag-aaral ng mga sample na kilala na naglalaman ng mga partikular na marker ng pathogen (hal., pathogen antigens o antibodies sa kanila).

Pagtitiyak- proporsyon ng negatibong resulta ng pagsusuri sa malulusog na pasyente. Ang pagtitiyak ng pamamaraan ay tinutukoy ng porsyento ng mga negatibong resulta ng pag-aaral ng mga sample na malinaw na walang mga tiyak na marker ng pathogen. Kaya, mas mataas ang sensitivity at specificity, mas maaasahan at mas maaasahang paraan pananaliksik.

Kasama rin ang mahahalagang pamantayan sa diagnostic reproducibility resulta mula sa paulit-ulit na pagsusuri ng parehong mga sample. Dapat tandaan na, sa kabila ng makabuluhang pag-unlad sa mataas na teknolohiya, walang mga pamamaraan na nagbibigay ng 100% (ganap) sensitivity at pagtitiyak sa lahat ng bioassay na pinag-aralan.

Sa kasalukuyan, ang mga sistema ng pagsubok, kit, at sangkap ay opisyal na nakarehistro sa Russia, na may mas mababa sa 95% sensitivity at specificity kapag nagse-set up ng isang reaksyon. Kaya, palaging may posibilidad na makakuha ng hindi sapat na resulta.

Pag-uuri ng mga pagsubok ayon sa uri ng antigen na ginamit. Treponemal at non-treponemal na pagsusuri para sa syphilis

Sa modernong venereology, higit sa isang dosenang mga variant ng serological reaksyon sa syphilis ay ginagamit para sa mga layunin ng diagnostic, na maaaring nahahati sa iba't ibang mga kategorya ayon sa iba't ibang pamantayan. Ang pag-uuri ay isinasagawa ayon sa pamamaraan ng pananaliksik, saklaw, bilis, mababang gastos, mga kinakailangan para sa mga kagamitan sa laboratoryo, atbp.

Ang mga reaksyon ng Treponemal ay mas tiyak sa teorya, ngunit nagbibigay din sila ng mga maling positibong resulta. Bukod dito, hindi nila pinapayagan ang pagkakaiba sa pagitan ng hindi ginagamot at gumaling na syphilis. Ang mga resulta ng mga reaksyong treponemal ay magiging positibo sa parehong mga kaso. Ang mga non-treponemal na reaksyon ay nakikilala sa pagitan ng hindi nagamot o kamakailang mga impeksyon at gumaling.

Sa panahon ng pagsusuri, inirerekomenda na isagawa ang parehong treponemal at non-treponemal na reaksyon. Upang maitatag at makumpirma ang diagnosis ng syphilis, ang mga positibong resulta ay kinakailangan para sa parehong uri ng mga pagsusuri - treponemal at non-treponemal. Samakatuwid, ang mga pagsubok na hindi treponemal ay ginagamit kasabay ng mga pagsusuri sa treponemal, at isinasagawa bago, sa panahon at pagkatapos ng pagtatapos ng paggamot sa mga tiyak na agwat ng oras.

1. Mga pagsubok na hindi treponemal

Ang pinakasikat sa mga pagsubok na hindi treponemal na may visual na interpretasyon ng mga resulta ay

• RW - Reaksyon ng Wassermann na may mga lipid antigens (complement fixation reaction na may cardiolipin antigen, RSKk)
• Kann reaksyon (hindi kasalukuyang ginagamit),
• cytocholic reaction ng Zaks-Vitebsky (hindi kasalukuyang ginagamit),
• microreaction ng precipitation na may plasma o inactivated serum (MRP o RMP),
• RPR (Rapid Plasma reagin test),
• TRUST (Toluidin Red Unheated Serum Test).

Sa mga pagsusuring hindi treponemal, mayroong 2 pagsubok na may mikroskopikong pagbabasa ng mga resulta ng reaksyon:

1. VDRL - (Venereal Disease Research Laboratory);

2. USR - pagsubok para sa pagpapasiya ng aktibong plasma reagins (Unheated Serum Reagins).

Ang reaktibiti sa mga pagsusuring hindi ntreponemal ay karaniwang nagpapahiwatig ng pagkasira ng tissue at hindi palaging partikular para sa syphilis. Ang kadalian ng pagpapatupad at mababang gastos ay nagpapahintulot sa kanila na magamit bilang mga reaksyon sa screening sa pagtatatag ng isang paunang pagsusuri ng syphilis.

2. Mga pagsubok sa treponemal

Ang mga pagsusuri sa treponemal ay gumagamit ng mga tiyak na antigen ng treponemal. Ang mga pagsusuring ito ay kinakailangan upang kumpirmahin ang diagnosis (RPHA, RIT, RIF at ELISA). Ang mga ito ay mas kumplikado at mahal kaysa sa mga pagsubok sa Pangkat 1, ngunit mas tiyak at sensitibo rin. Ang pagtuklas ng mga antibodies sa cerebrospinal fluid ay ginagawa din gamit ang mga pagsusuri sa treponemal.

Ang mga tradisyunal na pagsusuri sa treponemal na nagpapatunay ng diagnosis ng syphilis ay nangangailangan ng mamahaling kagamitan sa laboratoryo at mga may karanasang tauhan, kaya bihira itong gawin sa labas ng mga dalubhasang laboratoryo. Gayunpaman, maaari na silang palitan ng simple at mabilis na mga pagsusuri sa treponemal na maaaring isagawa sa field at gumamit ng buong dugo. Ang pagsasagawa ng mga reaksyong ito ay hindi nangangailangan ng pangmatagalang pagsasanay, mga espesyal na kondisyon para sa pag-iimbak ng mga reagents at kagamitan.

Ang comparative cheapness, kaginhawahan at pagiging praktiko ng treponemal express reaksyon ay nakakaakit ng pansin sa kanila hindi lamang bilang mga paraan ng pagkumpirma ng diagnosis. Ang mga reaksyong ito ay maaaring gamitin upang suriin para sa syphilis bilang bahagi ng pangunahing pangangalaga. Medikal na pangangalaga(maaari silang gawin sa field, sa parehong pasilidad ng pangangalagang pangkalusugan) o sa mga lugar kung saan walang mga laboratoryo. Gayunpaman, dahil ang mga antibodies sa T. pallidum ay natutukoy sa loob ng ilang taon, hindi alintana kung ang pasyente ay ginamot o hindi, ang mga treponemal na mabilis na reaksyon ay hindi maaaring gamitin upang masuri ang pagiging epektibo ng paggamot at differential diagnosis ng hindi nagamot at gumaling na syphilis.

Pag-uuri ng mga pamamaraan ng serological para sa pag-diagnose ng syphilis ayon sa uri ng mga antibodies na nakita

Sa modernong dermatovenereology, ang iba't ibang mga serological na reaksyon sa syphilis ay ginagamit para sa pagsusuri. Ang ilan sa mga pamamaraan na may kaugnayan sampung taon na ang nakaraan ay hindi na ginagamit dahil sa pagiging kumplikado o kakulangan ng pagtitiyak. Depende sa mga nakitang antibodies, ang mga pamamaraan ng serological diagnosis ng syphilis ay nahahati sa tatlong grupo:

I. Lipid (reagin) reaksyon - ang mga antibodies sa lipid antigens (reagins) ay tinutukoy:

1) flocculation: microreaction sa salamin na may lipid antigens - isang express diagnostic method (precipitation microreactions - MRP), VDRL, CMF (cardiolipin microflocculation test), RPR, atbp.;

2) complement fixation reaction (RSK) na may lipid antigens: Wasserman reaction (RV), qualitative at quantitative method of setting, thermostatic at in the cold (Colmer reaction);

3) sedimentary reactions na hindi kasalukuyang ginagamit: ang Cahn precipitation reaction, ang cytocholic Sachs-Vitebsky reaction, atbp.;

II. Ang mga reaksyon ng treponemal ng grupo - ang mga antibodies sa grupong treponemal antigens (na bahagi ng microbial cell ng parehong pathogenic at saprophytic treponemas) ay tinutukoy:

1) CSC na may antigen ng protina ng Reiter;

2) immunofluorescence reaksyon (RIF);

3) immune adhesion reaction (RIP).

III. Mga reaksyon ng treponemal na protina na partikular sa mga species - tinutukoy ang mga antibodies sa mga partikular na species na antigen ng Treponema pallidum:

1) reaksyon ng immobilization ng maputlang treponemas (RIT);

2) RIF-abs immunofluorescence reaksyon at mga variant nito (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS, atbp.);

3) reaksyon ng hindi direktang hemagglutination ng maputlang treponemas (TPHA) at ang pagbabago nito sa TPPA.

4) enzyme immunoassay (ELISA);

5) immunoblotting.

Praktikal na paggamit ng mga serological na pagsusuri para sa syphilis

Iba't ibang serological test ang ginagamit para sa iba't ibang praktikal na layunin.

Sa ibang bansa, sa mass survey ng populasyon at, kung kinakailangan, ang emergency detection ng syphilis, non-treponemal screening reactions (VDRL, RPR, atbp.) ay ginagamit. Nangangailangan ang diagnosis ng kumpirmasyon sa pamamagitan ng mga pagsusuri sa treponemal na FTA-ABS, TPHA, o TPPA. Sa kasalukuyan, inirerekomendang gamitin ang ELISA bilang kapalit ng VDRL sa mga pagsusuri sa screening. Ito ay dahil sa ang katunayan na ang pagsubok ng ELISA ay nakikilala sa pamamagitan ng pagiging sensitibo, pagtitiyak, ang kakayahang i-automate ang pananaliksik, pati na rin ang pagbuo ng mga diagnostic test kit. Bilang karagdagan, ang isang reverse scheme ng pagkakasunud-sunod ng pagsusuri para sa syphilis ay napatunayan, kapag ang mga pagsusuri sa treponemal ay ginamit muna.

Upang masubaybayan ang pagiging epektibo ng therapy at upang masuri ang aktibidad ng impeksyon, inirerekomenda ang quantitative VDRL. Ang ELISA test para sa antitreponemal IgM antibodies ay ginagamit bilang confirmatory/karagdagang pagsubok.

Sa domestic practice, isang complex ng serological reactions (CSR) ang ginagamit, kabilang ang isang microprecipitation reaction (RMP) na may cardiolipin antigen at CSC na may cardiolipin at treponemal antigens. Kamakailan, inirerekomenda sa CSR na palitan ang RSK ng ELISA o RPHA. RIF (at ang mga pagbabago nito - RIF-Abs at iba pa), RIBT ay ginagamit din.

Ang RIBT ay ginagamit bilang isang reaksyon sa pagsusuri sa mga kaso ng pagkakaiba-iba ng mga reaksyon ng treponemal.

Mga diskarte sa laboratoryo serological diagnosis ng syphilis sa Russian Federation

Ang pagpapakilala ng pinag-isang pamamaraan ng klinikal na pananaliksik sa laboratoryo sa pagsasanay sa USSR at ang Russian Federation ay naging posible upang ipakilala ang mas advanced na mga pamamaraan ng diagnostic, i-streamline ang gawain ng mga klinikal na diagnostic na laboratoryo, dagdagan ang produktibidad sa paggawa, bawasan ang pagdoble ng mga pagsubok sa laboratoryo, at naging batayan. para sa pagbuo ng mga nakapangangatwiran na anyo ng mga ready-made reagent kit.

Noong 1985, sa USSR, upang mapabuti ang diagnosis ng syphilis, ang non-treponemal CSC reaksyon na may nonspecific (Wassermann) antigen at sedimentary reactions (cytocholic at Cana) ay hindi kasama sa diagnostic complex bilang hindi gaanong sensitibo at hindi nagbibigay ng karagdagang impormasyon.

Sa halip, bilang bahagi ng complex ng serological tests para sa syphilis (CSR), ang paggamit ng complement fixation reaction na may treponemal at cardiolipin antigens (RSKt) at ang microprecipitation reaction na may cardiolipin antigen (RMP) ay ibinigay. Ang mas mataas na sensitivity at nilalaman ng impormasyon ng kumplikadong mga reaksyon na ito ay siniguro ang pagtuklas ng hindi lamang muling pagbabalik, kundi pati na rin ang mga antitreponemal antibodies.

1985

1. RMP na may cardiolipin antigen na may plasma ng dugo at hindi aktibo na serum ng dugo. Pagsubok sa pagpili sa kaso ng nakahiwalay na aplikasyon.

2. CSC na may treponemal at cardiolipid antigens; qualitative at quantitative na paraan ng setting, thermostatic at sa lamig;

3. Treponema pallidum immobilization reaction (RIT); test-tube at melange na mga paraan ng setting;

4. Immunofluorescence reaction (RIF) sa mga sumusunod na pagbabago: RIF with absorption (RIF-abs) na may blood serum at capillary blood, RIF-200, RIF na may buong cerebrospinal fluid (RIF-c); qualitative at quantitative na paraan ng pagtatakda. Diagnosis ng latent at late forms ng syphilis, pagkilala sa mga gumagawa ng desisyon (false-positive na resulta)

5. Complex of classical serological reactions (CSR): RSC (Wasserman reaction) na may cardiolipin at treponemal antigens + RMP. Preventive na pagsusuri ng populasyon para sa syphilis, pagsusuri ng lahat ng anyo ng syphilis, pagsubaybay sa pagiging epektibo ng paggamot, pagsusuri ng mga taong nakipag-ugnayan para sa syphilis.

Noong 2001, inaprubahan ng Ministri ng Kalusugan ng Russian Federation ang isang bagong dokumento ng regulasyon na kumokontrol sa pamamaraan para sa pagsasagawa ng mga pagsusuri sa diagnostic - Order of the Ministry of Health ng Russian Federation No. 87 na may petsang Marso 26, 2001 "Sa pagpapabuti ng serological diagnosis ng syphilis ".

Upang mapabuti ang pagsusuri sa laboratoryo ng syphilis, mapabuti ang kalidad ng trabaho at maiwasan ang karagdagang pagkalat ng saklaw ng syphilis, inirerekomenda na palitan ang RSK sa complex ng seroreactions (CSR) sa diagnosis ng syphilis sa pamamagitan ng ELISA at TPHA bilang screening at confirmatory test, dahil ang mga sistema ng pagsubok na ito ay lubos na sensitibo, tiyak at maaaring kopyahin.

Ang Order No. 87 ng Marso 26, 2001 "Sa pagpapabuti ng serological diagnosis ng syphilis" ay nagbibigay para sa paggamit ng mga sumusunod na pamamaraan para sa sero- at cerebrospinal fluid diagnosis ng syphilis sa Russia:

1. RMP at mga dayuhang analogue (VDRL, RPR at mga katulad na microreactions) bilang mga pagsusuri sa screening kapag sinusuri ang populasyon para sa syphilis. Ang RMP ay isinasagawa gamit ang plasma o hindi aktibo na serum ng dugo.
2. Enzyme immunoassay (ELISA). Antigen mula sa kultura o pathogenic treponema pallidum. Mga diagnostic na reaksyon, kabilang ang para sa diagnostic ng alak. Dahil sa kadalian ng pagtatakda at pagkakaroon ng mga komersyal na sistema ng pagsubok, maaari silang magamit bilang mga pagsusuri sa screening.
3. Ang reaksyon ng passive hemagglutination (RPHA). Antigen mula sa kultura o pathogenic treponema pallidum. Mga reaksyon sa pagpili at diagnostic.
4. Qualitative at quantitative variant ng RIF (RIF-abs, RIF-c, RIF na may capillary blood mula sa isang daliri). Antigen - pathogenic pale treponema ng Nichols strain.
5. Isang complex ng serological reactions (CSR) para sa syphilis, na binubuo ng isang complement fixation reaction (CFR) na may treponemal at cardiolipin antigens, at RMP. Posibleng palitan ang complement fixation reaction sa ELISA o RPHA kasama din ng RMP. Ang CSR ay tumutukoy sa mga diagnostic test.
6. Pale treponema immobilization reaction (RIBT), kung saan ginagamit ang pathogenic treponema pallidum ng Nichols strain bilang isang antigen. Ang mga RIBT ay mga diagnostic confirmatory test.

Kaya, ang pagkakasunud-sunod ng pagsusuri ng mga pasyente para sa syphilis sa mga pasilidad ng pangangalagang pangkalusugan ay inirerekomenda na planuhin tulad ng sumusunod:

1. Sa panahon ng paunang pagsusuri, ang isang seleksyon (screening) na reaksyon ng microprecipitation (RMP) o ang pagbabago nito (RPR, TRUST, VDRL) ay isinasagawa sa dami at husay na mga bersyon at, sa kaso ng isang positibong resulta, anumang partikular na confirmatory treponemal test ( RPHA, ELISA, CSR, RIF , RIT);

2. Pagkatapos ng pagtatapos ng therapy, inilalagay ang RMP o ang pagbabago nito, at ang dynamics ng nakakahawang proseso at ang pagiging epektibo ng therapy ay hinuhusgahan ng pagbaba ng titer. Ang kumpirmasyon ng pagiging epektibo ng therapy ay ang pagbaba ng titer ng 4 o higit pang beses sa loob ng 1 taon.

Reception sa pamamagitan ng appointment! Sabado Linggo.

Ang mga pagsusuri sa reagin ay ginagamit para sa mass screening ng mga pasyente para sa syphilis. Karaniwang isinasagawa ang mga ito bilang bahagi ng preventive examinations. Ang mga naturang pagsusuri ay magagamit sa bawat pasilidad ng medikal at mabilis na isinasagawa. Karaniwang handa na ang sagot pagkatapos ng 30-40 minuto.

Ang isang positibong resulta sa panahon ng mga reaksyon ng reagin ay hindi isang pamantayan para sa paggawa ng diagnosis. Kinakailangan ang mga karagdagang pag-aaral na partikular sa species.

Ang pinakakaraniwang paraan ng screening ay ang reaksyon ng Wasserman. Gumagamit ito ng cardiolipin at treponemal antigens. Kung walang mga reains sa serum ng dugo, pagkatapos ay magaganap ang hemolysis ng ram erythrocytes, na idinagdag bilang isang tagapagpahiwatig.

Sa pagkakaroon ng mga reagin, ang buong erythrocytes ay mauna, kung saan ang reaksyon ay itinuturing na positibo.

Reaginic sa mga sumusunod na kaso:

• iba pang mga sakit, ang mga sanhi ng ahente na katulad ng antigenic na istraktura sa pallidum spirochete
• pagbubuntis
• mga sakit sa oncological
• pagkuha ng salicylates
• Atake sa puso
• mga teknikal na pagkakamali sa pagsusuri

Sa isang positibong resulta ng reaginic na reaksyon, ang mga tiyak na serological na pagsusuri ay isinasagawa. Inirereseta rin ang mga ito kung may pagdududa ang negatibong resulta.

Ang mga Treponemal antigens ay ginagamit sa mga pagsusuri tulad ng RIF, RIT, ELISA, TPHA, hemadsorption reaction sa solid phase. Ang mga reaksyong ito ay batay sa pagbuo ng mga antigen-antibody complex at naiiba sa paraan ng kanilang pagpapasiya. Ang pinakakaraniwang ginagamit na reaksyon ay immunofluorescence.

Ang gamot ay ginagamot sa luminescent serum, na nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang mga immune complex sa ilalim ng fluorescent microscope.

Ang isa sa mga pinaka-sensitibong serological na pagsusuri para sa pag-diagnose ng syphilis ay ang TPHA. Ang pamamaraan ay may mataas na katumpakan. Madalas itong ginagamit upang i-verify ang diagnosis sa panahon ng pagbubuntis kapag ang ibang mga pagsusuri ay maaaring magbigay ng maling positibong resulta.

Mga tampok ng serodiagnosis

Para sa serological diagnosis ng syphilis sa iba't ibang panahon nito kumukuha ng dugo mula sa isang ugat. Inirerekomenda ang pagsusuri na isagawa sa walang laman na tiyan, binabawasan nito ang bilang ng mga maling positibong resulta. Ang tubo ay dapat na sterile. Kapag nagsasagawa ng mga express test, sa ilang mga kaso, ang dugo ay kinuha mula sa isang daliri.

Kung pinaghihinalaan, ang cerebrospinal fluid ay kinuha para sa serodiagnosis. Para sa pagsusuri nito, ang parehong mga pamamaraan ay ginagamit tulad ng sa pag-aaral ng dugo.

Upang masuri ang syphilis, dumaan sa isang kumpletong pagsusuri sa aming klinika.

Ang Russia ay umuunlad taon-taon. Gayunpaman, bawat taon libu-libong taong may sakit ang nakikita sa panahon ng pagsusuri. Ang mga pagsusuri para sa sakit na ito ay isinasagawa kapwa bago ang pagbubuntis at bago ang anumang nakaplanong pag-ospital. Bilang karagdagan, bawat taon ang mga kinatawan ng maraming mga propesyon ay sumasailalim sa medikal na pagsusuri, kung saan, bukod sa iba pang mga bagay, kailangan mong masuri para sa syphilis. At, siyempre, kung wala ang pagsusuring ito, ang isang karera bilang isang lingkod sibil, isang doktor, at simpleng mga bakante tulad ng mga guro, tagapagluto, at tagapagturo ay isasara para sa isang tao.

Alam ng modernong gamot ang maraming paraan upang makita ang maputlang treponema, na siyang sanhi ng sakit, sa dugo ng tao. Ang mga pamamaraang ito ay nahahati sa maraming malalaking grupo:

1. Sa unang pangkat ng mga pag-aaral - mga pagsubok kung saan ang pagkakaroon ng treponema ay hinanap sa biomaterial. Para dito, ang materyal ay kinuha para sa pananaliksik mula sa mga ulser o may sakit na organo.
2. Ang pangalawa, serological na grupo ng mga pamamaraan ay nagpapahintulot sa iyo na makilala ang mga hindi direktang bakas ng pagkakaroon ng treponema sa katawan. Ito ay tumutukoy sa mga antibodies, ang aktibong produksyon kung saan ang katawan ay tumutugon sa isang impeksiyon.

Opinyon ng eksperto

Artem Sergeevich Rakov, venereologist, higit sa 10 taong karanasan

Ang mga direktang pagsusuri ay gumagana nang mahusay sa mga unang sintomas ng sakit, ang mga serological na pagsusuri ay dapat isagawa mga isang linggo pagkatapos lumitaw ang unang ulser. Sa madaling salita, kung pinaghihinalaang impeksyon, pinakamahusay na gumamit ng direktang uri ng mga pagsusuri.

Diagnosis ng laboratoryo ng syphilis

Ang isang pag-aaral sa laboratoryo ay binubuo sa katotohanan na ang mga seksyon ng treponema DNA ay pinalaganap sa isang test tube sa ilalim ng mga kondisyon ng paulit-ulit na mga siklo ng temperatura. Sa bawat yugto, doble ang bilang ng mga artipisyal na kopya ng pathogen. Tinatawag ito ng mga eksperto na amplification ng mga fragment ng DNA. Mayroong paghihiwalay ng mga molekula ayon sa kanilang timbang, na ginagawang posible na makilala ang treponema.

PCR

Ang pamamaraan ng pagsasaliksik ng PCR ay gagawing posible na makahanap ng isang molekula ng syphilis, kahit na ito ay isa sa libu-libong iba pang mga molekula. Ang genetic na materyal para sa pagsusuri sa PCR ay maaaring makuha nang direkta mula sa syphilitic ulcers, cerebrospinal fluid, placental tissue, dugo mula sa isang daliri, at kahit na seminal fluid. Kadalasan, ang mga doktor ay gumagamit ng tissue fluid mula sa mga ulser.

Ang kahusayan ng pag-aaral ng PCR ay umabot sa 98.6%. Sa isang maayos na inihandang pag-aaral, ang mga maling positibong resulta sa pamamaraang ito ay halos hindi kasama. Gayundin, ang mga doktor ay gumagamit ng pamamaraang ito kung ipinapalagay nila ang isang maliit na nilalaman ng treponemas sa materyal ng pagsubok. Ito ang kadahilanan na nagiging mapagpasyahan kung kinakailangan upang magsagawa ng pagsusuri kung pinaghihinalaan ang congenital syphilis.

Dark field microscopy

Ang dark-field microscopic na pagsusuri ay itinuturing na isa sa pinakamurang, ngunit sa parehong oras epektibong pamamaraan para sa pag-detect ng pagkakaroon ng maputlang treponema, pati na rin ang:

1. Para sa pag-aaral, ginagamit ang isang espesyal na solusyon sa asin, kung saan inilalagay ang gamot. Pagkatapos nito, ang isang makitid na sinag ng maliwanag na ilaw ay nakadirekta sa glass slide. Dahil sa tinatawag na Tyndall phenomenon, ang mga pathogen ay nagsisimulang lumiwanag sa madilim na larangan ng solusyon.
2. Ang pinakamagandang materyal para sa ganitong uri ng pag-aaral ay ang mga sample ng tissue fluid na nakuha mula sa mga genital ulcer na matatagpuan, ayon sa pagkakabanggit, sa mga maselang bahagi ng katawan. Isa ito sa pinakamabilis na pagsusulit dahil ang mga resulta ng pagsusulit ay magiging handa sa loob ng ilang oras.

Gayunpaman, dapat itong isipin na ang paraan ng dark-field ay angkop para sa pag-detect ng mga nabubuhay pa ring treponemas. Alinsunod dito, hindi gaanong makatuwiran na sumailalim sa naturang pag-aaral pagkatapos ng pagsisimula ng panlabas na paggamot, dahil halos imposible na makita ang mga live na sample ng pathogen.

pagsubok sa RIT

Ang RIT test ay nagsasangkot ng paglipat ng materyal mula sa isang nahawaang tao sa mga kuneho sa laboratoryo. Ang sensitivity ng mga hayop na ito sa impeksyon sa syphilis ay umabot sa 100%, kaya kung ang mga maputlang treponema ay nakapaloob sa biomaterial ng pasyente, maaapektuhan din nila ang kuneho.

Gayunpaman, ngayon ang pamamaraang ito ay halos hindi ginagamit dahil sa mataas na gastos at oras. Sa mas mabilis na mga pagsusuri na magagamit, mas gusto ng mga doktor na huwag hintayin ang hayop na magpakita ng mga sintomas ng sakit. Gayunpaman, ang pamamaraang ito ay patuloy na ginagamit sa gawaing pananaliksik, at gayundin upang kumpirmahin o pabulaanan ang katumpakan ng iba pang mga uri ng pagsusuri.

Serodiagnosis ng syphilis

Pinapayagan ka ng mga serological na pamamaraan na ihiwalay hindi ang causative agent ng syphilis sa katawan, ngunit ang mga antibodies kung saan sinusubukan ng katawan na talunin ang sakit. Hinahati ng mga siyentipiko ang mga pamamaraan ng serological sa dalawang grupo, na tatalakayin sa ibaba.

Kasama sa mga pagsubok na hindi treponemal ang:

• RMP - reaksyon ng microprecipitation na may plasma at hindi aktibo na suwero;
• RPR - mabilis na plasma reagin test.

Kadalasan, ang mga espesyalista ay gumagamit ng mga non-treponemal na pagsusuri kung kinakailangan na gumawa ng mass screening para sa syphilis. Ito ay dahil sa ang katunayan na ang mga naturang pagsubok ay medyo mura, hindi nangangailangan ng mga espesyal na kagamitan sa laboratoryo at nailalarawan sa pamamagitan ng medyo mataas na katumpakan.

Hindi rin gaanong epektibo ang mga ito sa pagsusuri sa patuloy na paggamot. Sa kanilang tulong, maaari mong mabilis na masubaybayan ang antas ng mga antibodies sa syphilis sa dugo.

Kasama sa mga pagsusuri sa treponemal ang:

1. ELISA - enzyme immunoassay;
2. RPHA - passive hemagglutination reaksyon;
3. RIF - immunofluorescence reaksyon;
4. immunoblotting;
5. IHL - immunochemiluminescence;
6. RIBT (RIT) - reaksyon ng immobilization ng maputlang treponema.

Ang mga pagsusuri sa treponemal ay inireseta sa mga kaso kung saan kailangan mong tiyakin na ang resulta ng isang hindi-treponemal na pagsusuri ay hindi false positive. Ginagamit din ang mga ito sa mga kaso kung saan ang resulta ng screening gamit ang treponemal test ay naiba sa resulta ng non-treponemal test.

Bilang karagdagan, ang mga pagsusuri sa treponemal ay mahusay para sa paggamit kung ang sakit ay wala pang nakikitang mga pagpapakita, ngunit may mga hinala ng doktor batay sa kasaysayan at mga resulta ng pagsusuri. Sa kasamaang palad, ang mga pagsusuring hindi treponemal sa panahong ito ay hindi epektibo at kadalasang nagbibigay ng mga maling negatibong resulta.

Ipahayag ang mga diagnostic ng syphilis

Ang ganitong uri ng diagnosis ay kadalasang ginagamit para sa ilang partikular na grupo ng mga pasyente:

• Ang isang katulad na pagsusuri ay dapat gamitin ng bawat buntis upang maprotektahan ang kanyang sarili at ang kanyang hindi pa isinisilang na anak.
• Bilang karagdagan, ang mga taong nakatira sa parehong silid na may syphilitic na mga pasyente, hindi gumagamit ng pagpipigil sa pagbubuntis at madalas na nagbabago ng mga kasosyo sa sekswal ay maaaring gumamit ng pamamaraang ito. Ito ay angkop din para sa mga hindi maaaring sumailalim sa isang buong pagsusuri sa isang ospital o klinika.

Ang prinsipyo ng paggamit ng isang mabilis na pagsusuri para sa syphilis ay maaaring ihambing sa paggamit ng isang pagsubok sa pagbubuntis, ngunit kailangan mong kumuha ng ilang patak ng dugo dito.

Ang pagsusulit ay pinakamahusay na ginawa sa umaga sa isang walang laman na tiyan. Dalawang araw bago ang iminungkahing pagsusuri, inirerekomenda ng mga doktor na huwag uminom ng alak, at mga isang oras bago ang pamamaraan, isuko ang mga sigarilyo.

Ang pagsusuri mismo ay tumatagal ng kaunting oras:

1. Ang daliri ay dapat na disimpektahin ng isang punasan ng alkohol, pagkatapos nito ay dapat na pisilin ang ilang patak ng dugo mula sa hiwa papunta sa aparato ng pagsubok.
2. Pagkatapos ay idagdag ang ibinigay na reagent doon.
3. Sa karaniwan, kailangan mong maghintay ng 15 minuto bago lumabas ang resulta. Nagbabala ang mga eksperto na kung ang resulta ay lilitaw pagkatapos ng kalahating oras, maaaring ito ay mali.

Ano sa palagay mo ang pinakatumpak na paraan ng diagnostic?

SerodiagnosticsExpress Diagnostics

Dapat tandaan na kung ang isang tao ay nahawahan kamakailan, kung gayon ang katumpakan at pagiging maaasahan ng naturang pagsubok ay hindi lalampas sa 80%. Kaya tiyak na hindi katumbas ng halaga ito sa isang ganap na pagsusuri ng isang espesyalista.

Saan ako maaaring magpasuri para sa syphilis?

Maaari kang mag-order ng biomaterial na pag-aaral para sa syphilis:

• sa anumang klinika;

• pribadong klinika;

• mga laboratoryo.

Ang bentahe ng mga institusyong pambadyet ay ang serbisyong ito ay libre. Ang isang makabuluhang kawalan ay ang oras ng paghihintay para sa pagsusuri, ang mahinang logistik ng ilang mga klinika ng estado, at ang katotohanan na kung ang syphilis ay napansin, magiging mahirap na itago ang katotohanang ito.

Sumasang-ayon ang mga pribadong klinika at laboratoryo na makipagtulungan sa mga pasyente sa isang kumpidensyal na batayan. Ito ay angkop para sa mga hindi gustong malaman ang kanilang karamdaman. Ngunit dapat tandaan na ang form na may resulta, kung saan ang pangalan ng pasyente ay hindi lilitaw, ay hindi napapailalim sa pagtanggap sa anumang organisasyon.

Siyempre, kailangan mong magbayad para sa pagsusuri sa isang pribadong institusyon, ngunit ang resulta ay maaaring malaman sa loob ng 2-3 araw. Bukod dito, maraming mga klinika ang nag-aalok ng express testing nang walang anumang problema at iulat ang mga resulta ng mga pagsusuri sa loob ng ilang oras.

Magkano ang gastos para masuri para sa syphilis?

Ang tag ng presyo para sa pagsusuri ay depende sa uri nito. Ang screening test ay magagastos sa pasyente 300-400 rubles. Ang isang pagsusuri na tumutukoy sa pagkakaroon ng DNA sa isang partikular na uri ng biomaterial ay magagastos sa rehiyon 500 rubles.

Siyempre, ang mga presyo ay nag-iiba depende sa mga laboratoryo, ang mga materyales na ginamit at ang pangwakas na katumpakan ng pagsubok mismo. Sa kasong ito, madalas na gumagana ang panuntunan, ayon sa kung saan mas mahal ang pagsubok, mas tumpak ito.

Ang Syphilis ay isang mapanlinlang na sakit na dahan-dahan ngunit tiyak na hindi lamang sumisira sa mga panloob na organo, ngunit nakakaapekto rin sa buong sistema ng nerbiyos tao. Sa kabutihang palad, ang sakit na ito ay umuusbong sa isang tahimik na bilis, at ang agham ay nagsiwalat mabisang pamamaraan nilalabanan ito noong panahong naimbento niya ang penicillin, kung saan ang mga treponema ay mahina pa rin. Kaya ang pangunahing bagay ay sumailalim sa isang pagsusuri ng husay sa oras, at pagkatapos ay kumunsulta sa isang may sapat na kaalaman sa doktor.

Maaari mo ring panoorin ang video sa artikulong ito, kung saan sasabihin sa iyo ng doktor ang tungkol sa pagsusuri ng RIF para sa syphilis.

Ang Syphilis ay multifaceted. Ang impeksiyon, na pumapasok sa katawan, ay nag-iiwan ng mga marka hindi lamang sa balat at maselang bahagi ng katawan, ngunit sinisira din ang sistema ng nerbiyos, musculoskeletal system, baga, nakakapinsala sa pandinig at paningin. Sa kabila ng malawak na hanay ng mga sintomas at variant ng kanilang mga kumbinasyon, natutunan ng mga doktor na kilalanin ang sakit at tumpak na ipahiwatig ang yugto ng pag-unlad nito.

Nais ng lipunan na protektahan ang sarili mula sa impeksyon sa Treponema pallidum. Samakatuwid, ang isang bilang ng mga express test ay ibinigay para sa maagang pagsusuri ng syphilis o ang pagkakakilanlan ng mga carrier ng impeksyon. Ang panuntunan ay ang pag-sample ng dugo para sa mga diagnostic sa laboratoryo:

• sa mga kaso ng pagbubuntis;
• bago ang operasyon;
• mula sa mga donor bago mag-donate ng dugo o mga organo para sa paglipat;
• mga manggagawang medikal, guro, tagapagturo, manggagawa sa pagtutustos ng pagkain, atbp.;
• mga tauhan ng militar;
• sa mga bilanggo.

Ang pagsusuri sa laboratoryo at klinikal na pagsusuri para sa syphilis ay isasagawa para sa:

• mga pasyente na may mga palatandaan ng STD;
• mga kasosyo sa sekswal at iba pang miyembro ng pamilya ng isang taong nasuri na may syphilis;
• mga sanggol na ipinanganak mula sa isang may sakit na ina;
• sinumang nasuri na may isa pang sakit na nakukuha sa pakikipagtalik;
• pagsubok sa pagiging epektibo ng therapeutic na pamamaraan sa panahon ng paggamot;
• lahat ng nagpositibo.

Ang pamamaraan para sa pag-detect ng impeksyon sa appointment ng isang venereologist

Mula sa isang pag-uusap sa isang pasyente, nalaman ng doktor:

• kung ang kasosyo ay may nakumpirma na diagnosis ng syphilis;
• kung may mga pantal sa maselang bahagi ng katawan dati;
• Ang mga lymph node ba ay inflamed?
• kung may unprotected sex 3-4 weeks ago.

Sa panahon ng klinikal na pagsusuri sa balat, maselang bahagi ng katawan, anus, mauhog lamad, nalaman ng espesyalista ang pagkakatulad ng mga pantal at iba pang mga sugat sa balat sa mga katangian ng syphilis. Ang mga peripheral lymph node ay maingat na palpated upang masuri ang antas ng kanilang paglaki.

Sa mga kaso ng syphilides (hard chancre, roseol, papules, granulomas), inireseta ng doktor ang isang histomorphological na pagsusuri. Ang laboratoryo ay naglalarawan hitsura at pag-aralan ang nilalaman ng edukasyon. Batay sa mga resulta, ang yugto ng sakit ay hinuhusgahan.

Ang isang mapagpasyang kontribusyon sa pagsusuri ng syphilis ay ginawa ng pamamaraang laboratoryo ng pagtukoy sa pathogen o mga bakas ng immune response sa impeksiyon.

Ang diagnosis ay itinatag batay sa isang kumbinasyon ng data na nakuha pagkatapos ng isang klinikal na pagsusuri at mga pagsubok sa laboratoryo. Sa mga pambihirang kaso, kapag imposibleng magsagawa ng mga pagsusuri, ang paggamot ay inireseta batay sa pagsusuri.

Diagnosis ng mga komplikasyon

Ang pangalawang at tertiary syphilis ay maaaring magdulot ng mga komplikasyon na tinatawag na partikular na visceritis. Ang lahat ng mga organo at sistema ay maaaring isama sa proseso, ngunit kadalasan ang mga venereologist ay nagmamasid ng mga sugat:

• atay;
• sistema ng nerbiyos;
• buto;
• mga puso.

Ang syphilis ay lalong mapanganib para sa mga buntis. Bilang karagdagan sa kumplikadong pagbubuntis, intrauterine o vertical (sa kanal ng kapanganakan) na impeksiyon ng fetus, ang patay na pagsilang ay hindi ibinukod.

Mahalagang masuri hindi lamang ang impeksiyon, kundi pati na rin ang mga pangalawang sakit sa oras. Para sa layuning ito, bilang karagdagan sa mga tiyak na pagsusuri at pangkalahatang pagsusuri sa ihi at dugo, ang mga karagdagang pagsusuri ay isinasagawa (Talahanayan).

Mga pagsusuri sa laboratoryo ng mga biological na materyales

Ang pagsusuri sa laboratoryo ng syphilis ay nagsimulang bumuo mula noong 1905, nang natuklasan ang causative agent ng sakit, maputlang treponema. Bago ito, ang mga kuneho ay nahawahan ng mga nilalaman ng syphilides, na 100% ay madaling kapitan ng impeksyon. Noong 1906, binuo ni Wasserman ang unang serological test para sa syphilis (RW). Noong 1949, iminungkahi ng gamot ang isang mas tiyak na treponema pallidum immobilization test (TPT), ngunit ang RW ay hindi pa napaalis sa mga laboratoryo hanggang ngayon.

Ang mga unang pagsusuri ay pinapalitan ng mga modernong pamamaraan ng diagnostic. Magkaiba sila sa pamamaraan at layunin. Sa listahan ng mga kasalukuyang pagsubok:

• dark-field microscopy - nagsasangkot ng pag-aaral ng isang smear o pag-scrape upang makita ang treponema sa substrate na pinag-aaralan (sa pang-araw-araw na buhay, ang pag-aaral na ito ay tinatawag minsan na "pahid para sa syphilis");
• molecular biological na pamamaraan para sa pag-detect ng partikular na DNA (polymerase chain reaction, DNA probing);
• serological diagnosis ng syphilis sa serum ng dugo o cerebrospinal fluid.

Dark field microscopy

Ang mga sample ay kinuha mula sa mga sugat para sa mikroskopikong pagsusuri para sa maputlang treponema. Ang mga bagay ng pagsubok ay:

• nilalaman ng syphilis;
• tissue fluid;
• alak;
• amniotic fluid;
• himaymay ng kurdon.

Natanggap ng Treponema ang katangiang "maputla" dahil sa paglaban nito sa pagkilos ng karamihan sa mga tina. Ang isang buhay na mikrobyo ay malinaw na nakikita sa isang madilim na larangan na may espesyal na pag-iilaw. Ang katulong sa laboratoryo ay nakakakuha ng atensyon mga tampok na morphological bacteria at pinagmamasdan ang kalikasan ng kanilang paggalaw.

Para sa pagsusuri sa histomorphological, ang mga sample ay nabahiran ng pilak (ayon kay Morozov) o ayon sa Romanovsky-Giemsa.

Ang mga direktang microscopy na pamamaraan ay ginagamit upang masuri ang congenital disease o advanced stages ng syphilis. Maaari mong suriin ang kawastuhan nito sa pamamagitan ng direktang immunofluorescence reaction (RIF-Tr) o polymerase chain reaction (PCR). Sa unang kaso, ang mga anti-treponemal antibodies at isang fluorescent dye ay tumutulong upang makilala ang pathogen, at sa pangalawang kaso, ang mga molekula ng DNA ng maputlang treponema.

Maghanap ng pathogen DNA

Kahit na ang isang molekula ng DNA ng treponema ay maaaring makita sa isang pagsusuri sa dugo. Ang mga pag-unlad sa larangang ito ay naging posible mula noong 1991, nang naimbento ang polymerase chain reaction (PCR) test. Ang carrier ng namamana na impormasyon ay pinalaganap sa ilalim ng mga espesyal na kondisyon ng temperatura at paulit-ulit na kinopya ng isang enzyme - DNA polymerase. Pagkatapos, sa pamamagitan ng electrophoresis, ang nais na mga fragment ng kadena ay ipinahayag.

Ito ay isang napakatumpak at tiyak na pagsubok. Sa ibang bansa, ito ay naging pamantayang ginto para sa pag-diagnose ng syphilis. Sa Russia, ang PCR ay mas maraming pananaliksik kaysa sa klinikal.

Ang isa pang paraan upang makita ang treponema sa panahon ng DNA probing (hybridization ng mga nucleic acid). Sa kasong ito, ang denatured DNA ay konektado sa isang partikular na probe. Ang pagbabago sa kulay ng filter kung saan inilapat ang mga sample ay nagpapahiwatig ng kontaminasyon.

Mga pamamaraan ng serological diagnostic

Maaaring gamitin ang mga serological non-treponemal at treponemal test para sa iba't ibang layunin ng diagnostic. Sa panahon ng pagsusuri, ang mga antibodies sa maputlang treponema sa dugo ay napansin.

Bilang isang express diagnostic o screening, inirerekomendang sumangguni sa mga sumusunod na non-treponemal na pagsusuri:

• RPR - Pagsusuri sa Rapid Plasma Reains;
• RST, Reagin Screen Test;
• TRUST - pagsubok gamit ang toluidine red at unheated serum (Toluidin Red Unheated Serum Test);
• USR - pagsubok para sa pagpapasiya ng aktibong plasma reagins (Unheated Serum Reagins);
• VDRL – Venereal Disease Research Laboratory;
• precipitation microreactions (MRP) na may plasma o inactivated na suwero;
• complement fixation reaction (RSK) at ang mga variant nito na may cardiolipin antigen (RSKk).

Ang pamamaraan ay batay sa paghahanap ng mga antibodies (IgM at IgG) sa mga lipid ng mga nasirang selula at lipoprotein ng mga lamad ng pathogen. Ang mga pagsusuri sa itaas ay nagpapakita ng isang positibong sagot na isang linggo pagkatapos ng paglitaw ng mga unang syphilides.

Ang mga antibodies sa treponema mismo ay napansin ng mga pamamaraan:

• ELISA - enzyme immunoassay - ELISA (Enzymelynked immunosorbent assay);
• FTA - immunofluorescence reaksyon - RIF (Fluorescent treponemal antibody);
• RW - pandagdag sa mga reaksyon ng pag-aayos (reaksyon ng Wassermann);
• RW na may treponemal antigen - RSKt;
• TPHA - mga reaksyon ng passive hemagglutination - TPHA (Treponema pallidum haemagglutination assay);
• TPI - mga reaksyon ng immobilization ng maputlang treponema - RIBT o RIT (Treponema pallidum immobilization test);
• Western Blot - immunoblotting.

Sinusunod ng mga Venereologist ang isang tiyak na pamamaraan para sa pagsasagawa ng mga serological na pagsusuri. Bilang isang express diagnostic, isa sa mga non-treponemal na pagsusuri ay isinasagawa. Ang mababang sensitivity sa maaga at huling yugto ng impeksyon ay isinasaalang-alang. Samakatuwid, ang parehong negatibo at positibong mga tugon na may isang tiyak na klinikal na larawan ay dapat suriin muli ng mga pamamaraan ng treponemal.

Sa iba't ibang sitwasyon sa buhay, ang mga kumbinasyon ng positibo at negatibong mga sagot ay maaaring maobserbahan. Ang talahanayan ay makakatulong sa pag-decipher sa kanila.

Ang mga huling konklusyon ay ginawa ng venereologist batay sa isang hanay ng data: ang klinikal na larawan, histological at laboratoryo na pag-aaral.

Mga pinagmumulan:

1. Akovbyan V.A., Prokhorenkov V.I., Novikov A.I., Guzey T.N. // Syphilis: paglalarawan. hands-in (ed. V.I. Prokhorenkov). - M.: Medkniga, 2002. - S. 194-201.
2. Dmitriev G.A., Frigo N.V. // Syphilis. Differential clinical at laboratory diagnosis. – M.: Med. aklat, 2004. - S. 26-45.
3. Loseva O.K., Lovenetsky A.N. Epidemiology, klinika, diagnosis at paggamot ng syphilis: isang gabay para sa mga doktor. - M., 2000.
4. Pankratov V.G., Pankratov O.V., Navrotsky A.L. atbp. // Recipe (Appendix: International Scientific and Practical Conf. "Modern Approaches to the Diagnosis, Treatment and Prevention of Sexually Transmitted Infections", Grodno, 2005). - 2005. - S. 165-169.
5. Pankratov V.G., Pankratov O.V. // Mga modernong posibilidad ng mga diagnostic ng laboratoryo ng syphilis at interpretasyon ng mga resulta ng pananaliksik. – Minsk, Belarusian Medical Academy of Postgraduate Education, 2006.
6. Pankratov V.G., Pankratov O.V., Krukovich A.A. atbp. // Pangangalaga sa kalusugan. - 2006. - Hindi. 6. - P. 35-39.
7. Rodionov A.N. // Syphilis: isang gabay para sa mga doktor. - St. Petersburg: Peter, 1997. - S. 226-245.
8. Jurado R.L. // STD. - 1997. - Hindi. 3. - S. 3-10.
9. Schmidt B.L. // Unang Russian Congress of Dermatovenerologists: abstract. siyentipiko gumagana. - St. Petersburg, 2003. - T. II. - S. 40-41.
10. Romanowski B., Sutherland R., Flick G.H. et al. // Ann. Med. –1991. - V. 114. - P. 1005-1009.